哈希分光光度計采用空間分隔雙光束、非對稱(chēng)垂直式測量光路技術(shù),相對傳統的雙光束技術(shù)而言,因光路簡(jiǎn)捷使儀器的結構亦隨之簡(jiǎn)化,可靠性大為提高。不僅光譜帶寬、波長(cháng)精度符合包括藥典在內的各藥典的要求,更有為滿(mǎn)足采用相關(guān)法規進(jìn)行控制的GLP/GMP程序控制功能。
它的基本原理是溶液中的物質(zhì)在光的照射激發(fā)下,產(chǎn)生了對光的吸收效應,物質(zhì)對光的吸收是選擇性的,各種不同的物質(zhì)都具有其各自的吸收光譜,因此當某單色光通過(guò)溶液時(shí),其能量就會(huì )被吸收而減弱,光能量減弱的程度和物質(zhì)的濃度有一定的比例關(guān)系,即符合朗伯-比爾定律。
按照光源種類(lèi)劃分,哈希分光光度計可分為以下幾類(lèi):
1、比例雙光束UV,測試過(guò)程全封閉,單光束光源通過(guò)光柵,再經(jīng)棱鏡,分成2束UV,分別照射目標樣品與空白樣品,再合并光進(jìn)入光電倍增管檢測器檢測,經(jīng)差減法得到結果。目標樣品與空白樣品可以同時(shí)測量,測試靈敏度降低,全波段分析時(shí)間長(cháng)。
2、傳統單光束UV紫外測試,測試過(guò)程全程封閉,單光束光源只通過(guò)光柵直接照射樣品,再經(jīng)光電倍增管檢測器檢測。測試空白樣品之后才能測試目標樣品,全波段需要時(shí)間較長(cháng)為2min;
3、全波段UV:樣品與空白樣品可以暴露在空氣中,照射樣品后,進(jìn)入密閉箱,通過(guò)光柵,進(jìn)入DAD檢測器檢測。檢測樣品不需要密閉,外界光線(xiàn)對測試無(wú)影響,使用方便準確且空白只需要檢測一次,全波段分析時(shí)間小于1s。
4、雙光束UV:與比例雙光束UV不同之處是通過(guò)棱鏡分出兩道光后,在分別通過(guò)光柵,各自分別進(jìn)入光點(diǎn)倍增管檢測器檢測。加強了靈敏度,同時(shí)保留同時(shí)測量空白樣品與目標樣品的優(yōu)點(diǎn),全波段分析時(shí)間長(cháng)。